Odgovor:
GAPDH se pogosto uporablja kot obremenitveni nadzor.
Pojasnilo:
V Western blotingu pogosto uporabljamo GAPDH kot kontrolo nakladanja. To pomeni, da lahko s sondiranjem za GAPDH preverimo, da imamo na različnih pasovih madežev naložene enakovredne količine beljakovin.
Primer uporabe - recimo, da imamo bolezen, za katero menimo, da povzroča zvišanje določene beljakovine v celici. Izdelali bi vzorec iz "zdravih" celic in drugega vzorca iz "bolnih" celic. Nato bi naložili ekvivalentne količine beljakovin obeh vzorcev na gel za Western blot.
Po sondiranju blot-a za naš zanimiv protein smo ugotovili, da je v bolnih celicah raven beljakovin res povišana (to je temnejši pas na blotu). Da bi dokazali, da je to povečanje beljakovine posledica spremembe izražanja v celici, namesto nakladalnega artefakta (to pomeni, da je hitrejši trak povzročena s spremembo ekspresije beljakovin v celicah, in ne z naključno nalaganjem več. vzorca "bolezni", kot je "zdravo"), bi tudi raziskali blot za GAPDH, da pokažemo, da so skupne beljakovine enake v obeh pasovih.
Zato s tem dokazujemo, da je bila v obeh pasovih naložena ekvivalentna beljakovina in da je sprememba v intenzivnosti pasu, ki jo opazujemo, posledica sprememb v izražanju beljakovin, ki nas zanimajo.
Zakaj se uporablja formalna taksa? + Primer
Ker nam daje idejo o elektronski strukturi. Seveda je formalna obtožba formalizem. To pomeni, da nima nobenega resničnega obstoja, vendar je koncept lahko koristen za razumevanje strukture in vezave. Zelo zgodaj smo seznanjeni z idejo, da je "kovalentna vez" posledica delitve elektronov in "ionskega vezanja" iz prenosa elektronov. Tako nevtralna molekula metana, CH_4, nima ločitve naboja, in ionska vrsta NaCl je lahko predstavljena kot Na ^ (+) Cl ^ (-). Da bi metan obdržal na primer, ima molekula metana skupaj 10 elektronov: 6 iz C in 4 iz H. Za ogljik sta 2 njena elektrona notranje jedro in nista zasn
Zakaj se uporablja gensko spremenjena hrana? + Primer
Veliko razlogov - predvsem za nas vse. Gensko spremenjena živila gredo v verigo gensko spremenjenih organizmov - gensko spremenjenih organizmov. Obstaja veliko koristi, vendar potencialne nevarnosti zaradi uživanja GSO - to so razlogi, zakaj jih uporabljamo. Šel bom čez glavne. Če greste v svoj supermarket in kupite hrano iz odseka svežega sadja, je bilo 90% hrane že gensko spremenjenih. To je zato, ker človeška populacija raste in potrebujemo več hrane, da bi nahranili vse nas. Tako metoda za spreminjanje DNK hrane omogoča večje sadje, hitro razmnoževanje in več prehranskih koristi. Primer bi zajemal koruzo: kar se tiče p
Zakaj je Western blot uporabljen za potrditev elise? + Primer
Običajno je to test specifičnosti protiteles. V testu ELISA je zelo težko ugotoviti, ali se vaše protitelo veže na vašo beljakovino, ki vas zanima, popolnoma drugačno beljakovino ali vrsto beljakovin. Za preverjanje specifičnosti protitelesa bomo uporabili Western blot (treba je vedeti, da Western blot morda ne zazna vseh navzkrižnih reakcij z nepravilnimi proteini). V Western blotu lahko vidite velikost beljakovine, na katero se veže protitelo (ne morete v ELISA testu). Na primer, če bi moralo biti vaše protitelo vezano na beljakovino 56 kDa in opazite trak pri ~ 56 kDa na blotu, ste lahko razumno prepričani, da se protit