Odgovor:
Običajno je to test specifičnosti protiteles.
Pojasnilo:
V testu ELISA je zelo težko ugotoviti, ali se vaše protitelo veže na vašo beljakovino, ki vas zanima, popolnoma drugačno beljakovino ali vrsto beljakovin.
Za preverjanje specifičnosti protitelesa bomo uporabili Western blot (treba je vedeti, da Western blot morda ne zazna vseh navzkrižnih reakcij z nepravilnimi proteini).
V Western blotu lahko vidite velikost beljakovine, na katero se veže protitelo (ne morete v ELISA testu). Na primer, če bi moralo biti vaše protitelo vezano na beljakovino 56 kDa in opazite trak pri ~ 56 kDa na blotu, ste lahko razumno prepričani, da se protitelo veže na pravi protein.
Če ste na drugi strani opazili pas pri 32 kDa, lahko sklepate, da se protitelo veže na napačen protein. Podobno, če bi se na Western blotu pojavilo veliko pasov, ki bi pokazali (v odsotnosti razgradnje beljakovin), da je bilo protitelo vezano na vrsto različnih beljakovin.
V primeru 32 kDa pasu, ki se pojavlja na gelu, in tudi večkratnih pasovih, bi bilo mogoče sklepati, da protitelo nima specifičnosti za test ELISA in da rezultati, ki so bili vidni v testu ELISA, morda niso specifični za zanimivi protein.
Če bi se lotil te vrste testa, bi lahko vključil nekakšen "moteči" reagent za testiranje protiteles. Na primer, če sem dvignil svoje protitelo na peptid I, lahko vključuje peptid v primarni raztopini protiteles, da testiramo pravilno vezavo. To pomeni, da v prisotnosti peptida ne vidim nobenega traku ali rezultat ELISA, ker se moje primarno protitelo ne more povezati zaradi prisotnosti presežka peptida.
To je primer prenosa toplote s čimer? + Primer
To je konvekcija. Dictionary.com opredeljuje konvekcijo kot "prenos toplote s cirkulacijo ali premikanjem ogrevanih delov tekočine ali plina." Zadevni plin je zrak. Konvekcija ne zahteva gora, toda ta primer jih ima.
Zakaj si ne bi smel razdeliti neskončnega glagola, na primer: "Da bi pogumno šel" bi moral biti "oditi smelo". Zakaj?
Običajno je treba slediti 'do' s končano neskončno besedo. Običajno so prislovi slediti glagolom. Na ta način ni posebnega poudarka. Gramatično, v nobenem primeru ni problem. Včasih postanejo stavki zelo nerodni, ko so infinitivi razdeljeni npr. Nesmiselno je po mojem skromnem mnenju in po mnenju mnogih modrejših oseb, kot sem jaz, povedati deklici, da jo ljubiš, razen če to resnično misliš.
Zakaj se GAPDH uporablja v Western Blot? + Primer
GAPDH se pogosto uporablja kot obremenitveni nadzor. V Western blotingu pogosto uporabljamo GAPDH kot kontrolo nakladanja. To pomeni, da lahko s sondiranjem za GAPDH preverimo, da imamo na različnih pasovih madežev naložene enakovredne količine beljakovin. Primer uporabe - recimo, da imamo bolezen, za katero menimo, da povzroča zvišanje določene beljakovine v celici. Izdelali bi vzorec iz "zdravih" celic in drugega vzorca iz "bolnih" celic. Nato bi naložili ekvivalentne količine beljakovin obeh vzorcev na gel za Western blot. Po sondiranju blot-a za naš zanimiv protein smo ugotovili, da je v bolnih celi