Zakaj je nujno, da se isti restrikcijski encim uporabi za cepitev (rezanje) DNA obeh organizmov, ki se uporabljajo za ustvarjanje transgenskega organizma?

Zakaj je nujno, da se isti restrikcijski encim uporabi za cepitev (rezanje) DNA obeh organizmov, ki se uporabljajo za ustvarjanje transgenskega organizma?
Anonim

Odgovor:

Glej spodaj…

Pojasnilo:

Omejevalni encimi se režejo na določenih zaporedjih, tako da je treba uporabiti isti restrikcijski encim, ker bo ustvaril fragmente z enakimi komplementarnimi lepljivimi konci, zaradi česar se lahko med njimi oblikujejo vezi.

Obstajajo nekatera združljiva omejevalna spletna mesta, ki jih je mogoče uporabljati skupaj. Primeri sta Xho1 in Sal1. Njihovi lepljivi konci se ujemajo, zato jih je mogoče povezati skupaj. Toda ligiranje ubije tako Xho1 kot Sal1 mesto, tako da ne morete uporabiti nobenega od teh dveh za ponovno rezanje (na lokacijah ligacij).

Lahko uporabimo tudi eksonukleazo ali PCR, da naredimo najbolj lepljive konce (5 ali 3 previsov) v topo mesto - na ta način se lahko povežejo v topo mesto rezanja - vendar bo to na splošno ubilo tudi topo mesto.