Kaj je kromatofokusiranje?

Kaj je kromatofokusiranje?
Anonim

Odgovor:

Kromatofokusiranje je tehnika ločevanja beljakovin, ki omogoča ločevanje posameznih beljakovin in drugih amfolitov iz kompleksne zmesi glede na razlike v njihovih izoelektričnih točkah.

Pojasnilo:

To tehniko sta uvedla Stuyterman in njegovi sodelavci med letoma 1977 in 1981. Kromatofokusiranje uporablja ionske izmenjevalne smole in se običajno izvaja na hitro tekočinsko kromatografijo.

Uporablja pakiranje stolpcev ionskega izmenjevalca in notranje ustvarjen pH gradient, ki potuje skozi kolono kot zadržana fronta. Interakcija med gradientom pH in amfoternimi snovmi, kot so beljakovine, povzroči, da te snovi zapustijo kromatografsko kolono na značilnih mestih v iztoku kot usmerjene pasove.

Ta gradientna elucijska kromatografska tehnika je močno orodje za čiščenje beljakovin, saj lahko razreši zelo podobne vrste, ki se razlikujejo po 0,02 mejnih vrednostih pH, ki se ne morejo dobro ločiti s tradicionalnimi strategijami izmenjave ionov.