PBR322 je plazmid, ki ima dve restrikcijski mesti za EcoRI, medtem ko ima DNA DNA T4 tri restrikcijska mesta za to. Ti dve DNA smo obdelali z EcoRI in pustili, da tečeta na agaroznem gelu. Kakšen vzorec boste dobili na gelu?

PBR322 je plazmid, ki ima dve restrikcijski mesti za EcoRI, medtem ko ima DNA DNA T4 tri restrikcijska mesta za to. Ti dve DNA smo obdelali z EcoRI in pustili, da tečeta na agaroznem gelu. Kakšen vzorec boste dobili na gelu?
Anonim

Odgovor:

Neveljavno vprašanje, T4 ima približno 40 mest za EcoR1, ne 3 …

pBR322 ima samo 1 mesto za EcoR1, med genom faktorja odpornosti AMP in genom TET …

Pojasnilo:

T4 digestije: (hvala, Springer Verlag!)

sliko iz

© Springer-Verlag 1981

Če pa je vaše vprašanje bolj hipotetično:

tako pBR322 kot T-genomi so krožni, tako:

pBR322: 2cuts = 2 fragmenta,

T4: 3okroži = 3 fragmenti.

V teku na agaroznem gelu boste videli 2 pasova v pBR-pasu, 3 pasove v T4 pasu, Če je 2 ali več fragmentov enake ali blizu enake velikosti.. V tem primeru se selijo bolj ali manj z enako hitrostjo in se ne bodo razlikovali. Relativno razmerje G / C in A / T ima tudi učinek.

Torej, na koncu, če so fragmenti v tem hipotetičnem primeru različni po velikosti, 2 pasova za pBR, 3 za T4 …