Kaj je SDS-PAGE beljakovin?

Kaj je SDS-PAGE beljakovin?
Anonim

Odgovor:

Gre za ločevanje beljakovin glede na njihovo molekulsko maso.

Pojasnilo:

SDS-PAGE je ločevanje beljakovin na električnem polju na osnovi njihove molekulske mase.

Proteini so denaturirani s segrevanjem na med 70 in 100 ° C v prisotnosti spojin, kot sta 2-merkaptoetanol ali ditiotreitol in SDS (natrijev dodecil sulfat). Merkaptoetanol ali ditiotreitol razbije disulfidne vezi v beljakovini in povzroči, da se razvije in postane linearna (kot dolga vrvica brez gub). SDS bo pomagal pri procesu razkritja in tudi pokrival beljakovino v negativnem naboju.

Zmes nato nanesemo na poliakrilamidni gel (PAGE bit v SDS-PAGE) in uporabimo električni tok. Negativno nabite beljakovine se bodo gibale v električnem polju. PAGE bo preprečil gibanje večjih beljakovin v zelo kratkem času v primerjavi z majhnimi beljakovinami (PAGE deluje kot sito). Posledica tega bo, da bodo velike beljakovine ostale blizu začetku gela, medtem ko se bodo majhne beljakovine premaknile še naprej v PAGE.

Delovanje SDS-PAGE si lahko ogledate v spodnjem videoposnetku: